HPLC整機(jī)幾項(xiàng)最關(guān)鍵的性能技術(shù)指標(biāo)的測(cè)試方法

　　1、靈敏度的測(cè)試方法

　　HPLC的靈敏度可定義為：一、定量的物質(zhì)，通過(guò)HPLC的檢測(cè)器時(shí)，儀器所給出的信號(hào)大小就叫做該HPLC的靈敏度，有時(shí)也稱為響應(yīng)值。對(duì)使用者來(lái)講，總是希望HPLC儀器有較高的靈敏度，因?yàn)殪`敏度高，就意味著對(duì)等量的同一樣品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，儀器有較大的輸出信號(hào)。但是，靈敏度的高低，并不能表示HPLC儀器的檢測(cè)能力。只有檢出限，才能表示儀器的最大檢測(cè)能力。

　　HPLC靈敏度的測(cè)試方法：主要根據(jù)信噪比的定義進(jìn)行測(cè)試。一般取信號(hào)等于或大于噪聲2倍時(shí)的檢測(cè)量或濃度(信號(hào)強(qiáng)度)作為HPLC的信號(hào)大小。信號(hào)與噪聲二者相除即為儀器的信噪比(靈敏度，但是要求S/N≧2)。

　　2、檢測(cè)限測(cè)試方法

　　講HPLC的指標(biāo)、給出HPLC的譜圖，應(yīng)該實(shí)事求是的給出使用的靈敏度量程(一般使用最靈敏量程)，給出樣品濃度(一般是噪聲的3倍左右)，才能說(shuō)明儀器的檢測(cè)限或靈敏度。

　　3、光學(xué)類檢測(cè)器噪聲的測(cè)試方法

　　HPLC的噪聲是一種與被測(cè)樣品無(wú)關(guān)的、隨機(jī)輸出的信號(hào)。國(guó)際上對(duì)噪聲的定義、測(cè)試方法各異。例如：美國(guó)材料協(xié)會(huì)制訂的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)(ASTM)，規(guī)定噪聲分為長(zhǎng)噪聲、短噪聲、和超短噪聲三種。長(zhǎng)噪聲是指每小時(shí)內(nèi)有6個(gè)至60個(gè)變化周期的噪聲，所以，測(cè)定時(shí)間至少應(yīng)該測(cè)試一小時(shí);短噪聲是指每小時(shí)內(nèi)有1個(gè)至10個(gè)變化周期的噪聲，所以，測(cè)定時(shí)間至少應(yīng)該測(cè)試10分鐘至60分鐘內(nèi);超短噪聲是指每分鐘內(nèi)有10個(gè)以上的變化周期的噪聲，所以，測(cè)定時(shí)間應(yīng)該大于1分鐘。

　　從使用者的角度看，噪聲又分為靜態(tài)噪聲和動(dòng)態(tài)噪聲。其測(cè)試方法如下：

　　1)靜態(tài)噪聲測(cè)試：冷態(tài)開(kāi)機(jī)(關(guān)機(jī)2小時(shí)后開(kāi)機(jī))，預(yù)熱30分鐘，連續(xù)測(cè)試1小時(shí)。在這1小時(shí)里，任取10分鐘(包含最差的峰-峰值)，在這10分鐘里取峰對(duì)峰值(P-T0-P)的最大值，就是儀器的噪聲。但是，10分鐘里的峰對(duì)峰(P-T0-P)值，不同于10分鐘里的任一地方的峰-峰(P-P)值，即：“10分鐘里的峰對(duì)峰”值，不等于瞬時(shí)的峰-峰(P-P)值，測(cè)試數(shù)據(jù)前面應(yīng)加“±”符號(hào)。

　　注意：開(kāi)機(jī)30分鐘后，儀器調(diào)整到最靈敏度檔(如：對(duì)量程為0.005-3.0AUFS的儀器，取0.005AUFS，即縱坐標(biāo)設(shè)置為0.005A);設(shè)置波長(zhǎng)λ=250nm(有人設(shè)置500 nm，但最好測(cè)試250 nm);設(shè)置0 Abs(即時(shí)間掃描，吸光度從0點(diǎn)開(kāi)始測(cè)試);光譜帶寬(SBW)=2nm(固定光譜帶寬的儀器不需選擇)。

　　在上述條件下，連續(xù)測(cè)試1小時(shí)(用儀器上的CRT指示輸出，或用數(shù)字電壓表監(jiān)測(cè))。在1小時(shí)內(nèi)，任取10分鐘的峰對(duì)峰值(P-T0-P)，其最大者前面加“±”符號(hào)，即是儀器的噪聲。目前，國(guó)際上大多數(shù)科技工作者，基本上采用這種方法測(cè)試HPLC儀器的靜態(tài)噪聲。

　　有些科技工作者，認(rèn)為在10分鐘的峰對(duì)峰值(P-T0-P)前如果要加“±”符號(hào)，就應(yīng)對(duì)峰-峰值的絕對(duì)值先除“2”。這種做法是不妥的，會(huì)低估儀器的噪聲。因?yàn)樵肼暿请S機(jī)的，可能是“+”值也可以是“-”值。

　　上述儀器條件的設(shè)置，在有些儀器上是不需要的，因?yàn)橛捎谟?jì)算機(jī)的發(fā)展和普遍應(yīng)用，很多儀器的坐標(biāo)設(shè)置，完全由儀器的計(jì)算機(jī)自動(dòng)設(shè)置。